新型冠状病毒实验室核酸检测方法及实践Detection of nucleic acid of 2019-nCoV in medical laboratory and its practice
匡慧慧,于梅,于帅,周汉王,王依函,朱乔,肖征,李慧灵
摘要(Abstract):
目的研究新型冠状病毒(2019-nCoV)实验室核酸检测的原理方法,探讨实时荧光定量PCR方法在新型冠状病毒实验室检测中的价值与实验室注意事项。方法采用实时荧光定量PCR方法检测2020年1月23日-2020年2月2日就诊于解放军总医院海南医院发热门诊的患者以及筛查的湖北旅居者的咽拭子,采用实时荧光定量PCR的方法检测新型冠状病毒开放读码框1ab(ORF1ab)、核壳蛋白(N)基因。结果共检测的3 824例标本中,阳性病例35例,阳性率0.91%。结论疫情期间对发热门诊患者及湖北旅居者进行2019-nCoV核酸筛查是非常有必要的,实时荧光定量PCR是一种检测2019-nCoV科学可靠的方法,能快速准确地检测待检标本中的2019-nCoV核酸,对监测和控制疫情有重要意义。
关键词(KeyWords): 新型冠状病毒;新型冠状病毒肺炎;实时荧光定量PCR;核酸;实验室检测
基金项目(Foundation):
作者(Author): 匡慧慧,于梅,于帅,周汉王,王依函,朱乔,肖征,李慧灵
参考文献(References):
- [1] 国际病毒分类委员会将新型冠状病毒命名为SARS-CoV-2[EB/OL].http://www.chinanews.com/gj/2020/02-12/9088314.shtml
- [2] Kahn JS,Mcintosh K.History and recent advances in coronavirus discovery[J].Pediatr Infect Dis J,2005,24(11 Supp):S223-S227.
- [3] De Groot R,Baker S,Baric R,et al.Middle East Respiratory Syndrome Coronavirus(MERS-CoV):announcement of the Coronavirus Study Group[J].J Virol,2013,87(14):7790-7792.
- [4] Zhu N,Zhang D,Wang W,et al.A novel coronavirus from patients with pneumonia in China,2019[J].N Engl J Med,2020,Jan.DOI:10.1056/NEJMoa2001017.
- [5] 医政医管局.新型冠状病毒肺炎诊疗方案(试行第五版)[EB/OL].(2020-02-05) [2020-02-14].http://www.nhc.gov.cn/yzygj/s7653p/202002/3b09b894ac9b4204a79db5b8912d4440/files/7260301a393845fc87fcf6dd52965ecb.pdf.
- [6] 袁易,王铭杰,张欣欣.第三代测序技术的主要特点及其在病毒基因组研究中的应用[J].微生物与感染,2016,11(6):380-384.
- [7] 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所官网[EB/OL].http://ivdc.chinacdc.cn/kyjz/202001/t20200121_211337.html)2020年1月21日公布
- [8] 中华人民共和国国家卫生健康委员会.中华人民共和国国家卫生健康委员会公告(2020年第1号)[EB/OL].(2020-01-20)[2020-02-14].http://www.nhc.gov.cn/jkj/s7916/202001/44a3b8245e8049d2837a4f27529cd386.shtml.
- [9] 满春花,糜自豪,孙乐乐,等.实时荧光定量PCR在皮肤结核诊断中的应用[J].中国麻风皮肤病杂志,2019,34(4):215-218.
- [10] 张国庆,刘恩才,韩福强,等.实时荧光定量PCR方法在布鲁氏菌病诊断中应用[J].疾病监测与控制,2019,13(1):34-36.
- [11] 郑南才,刘鹰航,梁均和,等.核酸检测在寨卡病毒病诊断上的应用[J].中华医院感染学杂志,2017,27(6):1218-1220.
- [12] Wang D,Hu B,Hu C,et al.Clinical characteristics of 138 hospitalized patients with 2019 novel coronavirus-infected pneumonia in Wuhan,China[J].JAMA,2020,Feb.DOI:10.1001/jama.2020.1585.
- [13] 新型冠状病毒肺炎病毒核酸检测专家共识,中华检验医学杂志,2020,100(00):E003-E003.
- [14] 孟庆义,李立艳,李蕾.论实验室检查临床解读的五重境界[J].中国急救医学,2020,40(1):1157-1162.
- [15] Xie X,Zhong Z,Zhao W,et al.Chest CT for typical 2019-nCoV pneumonia:relationship to negative RT-PCR testing[J].Radiology.2020:200343.doi:10.1148/radiol.2020200343.[Epub ahead of print]
- [16] 陈炜,张春阳,朱颖,等.4例新型冠状病毒感染病例咽拭子与痰标本病毒核酸检测的比较[J/OL].中国人兽共患病学报:1-7[2020-03-18].http://kns.cnki.net/kcms/detail/35.1284.R.20200211.2118.002.html.